Principios y Aplicaciones de la Inmunohistoquímica
La inmunohistoquímica es una técnica de laboratorio que se utiliza para identificar y localizar antígenos específicos en secciones de tejido, empleando anticuerpos marcados con enzimas o fluorocromos. Esta técnica es fundamental en el diagnóstico patológico y en la investigación biomédica, ya que permite la detección de proteínas, polisacáridos y otras moléculas en su contexto tisular. El procedimiento incluye la preparación de la muestra, la recuperación antigénica para exponer los epítopos, el bloqueo de componentes endógenos que puedan causar fondo no específico y la incubación con anticuerpos primarios y secundarios. La visualización de los antígenos se logra mediante la formación de un complejo visible, generalmente de color marrón, que indica la presencia del antígeno de interés.La Técnica del Radioinmunoensayo en la Detección de Antígenos
El radioinmunoensayo (RIA) es una técnica analítica altamente sensible que utiliza isótopos radioactivos para detectar y cuantificar antígenos o anticuerpos en una muestra. Introducido por Rosalyn Yalow y Solomon Berson en la década de 1960, el RIA ha sido fundamental en la endocrinología y otras áreas de la medicina y la biología. La técnica se basa en la competencia entre antígenos marcados y no marcados por sitios de unión en anticuerpos específicos, con la radioactividad proporcionando una medida cuantitativa de los complejos formados. A pesar de su utilidad, el RIA ha sido reemplazado en muchos laboratorios por métodos no radioactivos debido a preocupaciones de seguridad y manejo de residuos radiactivos.Procedimiento y Utilidad Clínica del Radioinmunoensayo
El procedimiento de RIA implica la incubación de antígenos marcados con radioisótopos y antígenos de la muestra con anticuerpos específicos. Los complejos antígeno-anticuerpo formados se separan de los no unidos y se mide la radioactividad de la fracción inmune para determinar la concentración del antígeno en la muestra. El RIA se ha utilizado ampliamente para medir hormonas, drogas terapéuticas y marcadores de enfermedades infecciosas. La técnica es cuantitativa y la cantidad de radioactividad medida es inversamente proporcional a la cantidad de antígeno presente en la muestra. Aunque el RIA sigue siendo una herramienta valiosa en ciertas aplicaciones, su uso ha disminuido debido a la preferencia por métodos más seguros y convenientes como los ensayos inmunoenzimáticos (ELISA).